Bacterial Expression-盟基生物科技股份有限公司

客製化抗體-盟基生物科技股份有限公司

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Bacterial Expression

Bacterial Expression

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Bacterial Expression

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一、服務介紹
原廠的細菌蛋白表達服務(Bacterial Expression) 是一套完整的 E. coli 重組蛋白表達與純化平台,從基因優化設計到重組蛋白純化,為客戶提供一站式解決方案。

蛋白表達系統比較 
系統 原核 真核
物種 大腸桿菌(E.coli) 哺乳細胞(HEK293 & CHO cell)
優點 成本低
生產快速
蛋白產量高
完整的轉譯後修飾(PTM)
具有生物活性
內毒素低,可直接用於In vivo實驗
缺點 無PTM
易形成不可溶蛋白
需額外去內毒素
成本高
蛋白產量較低
 

二、服務優勢
1. 經評估可保證純度與產量
2. 可保證蛋白溶解度,但不保證生物活性或功能性
3. 其保證型方案失敗不收費,目前成功率高達95%



三、服務方案

a. 產量保證型方案 (需事先評估,符合方可適用)
方案內容 保證產量 生產週期 純度
產量保證型方案*
(Tagged: His/MBP/GST)
3mg 4-6 weeks
(不含國際運送時間)
85%
90%
95%
5mg 85%
90%
95%
10mg 85%
90%
95%
Other Quantity Quote
產量保證型方案*
(Tag-free)
3mg 85%
90%
5mg 85%
90%
10mg 85%
90%
Other Quantity Quote
 

b. 階段表達型方案
步驟 規格 交期
1. Gene synthesis or Subcloning, Plasmid Prep A).Gene synthesis sub cloning into expression vector Varies
(Please inquire)
B).Or provide your expression constructs, we’ll sub-clone your gene into our expression vector
2.Expression Pilot Study & Optimization A).Protein expression evaluation: Transformation and 37℃ inducing condition (5 cloning)
B).Optimization and solubility analysis: Two temperature (37℃ and 15℃); Two IPTG concentration(0.2mM and 1mM IPTG)
3.Protein Purification 1L expression and purification, protein (purity>85%)
4.Scale-up and purification Large scale expression & purification at your desired quantity (mg to g)
5.Tag removal and endotoxin removal and other steps(Optional) Perform tag removal ,endotoxin removal,higher purity and other steps as needed per your request
6.QC testing SDS-PAGE and Western Blot(tagged protein only)
備註:
1)產量保證型方案優先上清純化,若上清純化困難或蛋白不可溶,將直接嘗試包涵體(inclusion body)變復性純化;
2)若客戶對蛋白緩衝液、濃度等有特殊要求,請提前告知便於綜合報價以及安排後續的生產。
3)交付的蛋白是否可以滿足客戶的下游運用,需要客戶自行驗證。



四、客戶提供資訊
1. 胺基酸序列
2. 表達規格
3. 表達細胞
專用表單可評估適切方案,請洽當區業務 !



 
五、到貨規格
1. 重組蛋白(常規為凍乾型式)
2. 帶有基因的表現載體(產量保證型方案不交付表達載體,需額外加購)
3. SDS-PAGE 分析報告 (Word檔)




六、案例分享
​​​​​​案例1: Somatotropin
此為不可溶蛋白會形成Inclusion Body,且容易產生Polymerization現象,利用獨家的產程優化成功純化出高品質蛋白。


案例 2: Interleukin 
此蛋白為溶解度差並含有鏈內二硫鍵,且容易產生Polymerization現象,利用獨家的產程優化成功純化出高品質蛋白。