Antibody sequencing-客製化抗體-盟基生物科技股份有限公司

客製化抗體-盟基生物科技股份有限公司

Antibody humanization

Antibody humanization

Antibody Engineering & Optimization

Antibody humanization

抗體人源化

一、服務介紹

單株抗體藥物開發的初期常用鼠源單抗進行研究,近年來為了避免抗體藥物開發應用於人體時,所造成的人抗鼠抗體反應 (HAMA, human anti-mouse antibody response),引起人體的免疫排斥反應,影響抗體治療的安全性與療效,開始將肯體人源化,人源化抗體來自鼠源的比例降低可降低其使用於人體時所造成的免疫反應,此外,較不易被分解之特性可提高抗體於人體內存在的時間,因此,人源化抗體可將鼠源抗體轉化為有效且安全的治療藥物模式,於後續應用如新藥開發是極為重要的環節。人源化抗體即為全株抗體皆為人類,僅有互補決定區是老鼠,約佔抗體5-10%,經過親和力重塑,可維持抗體本身之特異性與大部分的親和力,幾乎去除免疫源性與毒性之副作用 (圖一)

圖一:單株抗體v.s 人源化抗體結構示意圖
GenScript之人源化抗體服務 (Antibody humanization service)利用噬菌體表現 (phage display)與其獨家專利技術FASEBA,經由抗體結構相關資訊,可進而對未經純化的抗體進行高通量篩選,能夠獲得最佳親和力抗體之重組蛋白分析,為您節省大量時間與成本。

何謂FASEBA (FAst Screening for Expression level, Biophysical properties, and Affinity technology)?

FASEBA將SASA蛋白融合至antibody library,再利用Phage display方式可提供大量clone pool,並透過E.coli系統產生含有SASA融合蛋白之抗體cell lysate,再透過 (1)ELISA分析可篩選具有最佳蛋白表現水平或最佳物理化學性質之clone或 (2)透過表面等離子共振技術 (SPR, Surface Plasmon Resonance)進行親和力排序 (圖二)。

圖二:FASEBA流程

1. SASA protein tag具有高穩定性並且與anchor protein有高度親和力,可作為理想的融合蛋白,建構帶有融合蛋白 (SASA)之antibody/protein library。
2. 利用Phage display方式可提供大量clone pool,以E.coli系統產生含有SASA融合蛋白之抗體cell lysate。
3. 透過ELISA方式篩選最佳蛋白表現:可專一辨識融合蛋白並精準分析融合蛋白的量。
4. 透過ELISA方式篩選最佳物理化學性質:於變性 (denature)條件下處理樣品、除去形成的聚集體 (aggregates)以及比較除去融合蛋白之clone百分比。
5. 透過SPR方式篩選最佳親和力:利用 BIAcore T200平台可精準分析抗原與抗體間之親和力。



抗體藥物開發 v.s GenScript FASEBA antibody humanization
抗體藥物開發目前遇到的問題 GenScript利用FASEBA解決抗體藥物開發所面臨的難題
較低的表現水平 高表現水平
Protein aggregation與不穩定性 高穩定性與thermo-stability
親和力不足 高親和力


二、服務特色
✓ 原廠擁有多年的人源化抗體設計經驗,分析CDR 位置並選擇最合適的human germline sequence
✓ 使用back mutation 技術,以維持人源化抗體的親和力
✓ 服務包含,gene synthesis ,cloning, small scale production, HTP FASEBA platform, affinity measurement by SPR assay
✓ 保證親和力:保證人源化抗體的親和力與chimeric antibody 差異不超過3倍
✓ 快速交貨:只需3~4 個月即可完成人源化抗體的設計與篩選
✓ 提供完整的設計報告 & 0.5~1mg 的純化人源化抗體
✓ 100% 成功率