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活動時間：即日起至6/15
Western Blot 必備小物
蛋白質定量的好夥伴 Bradford & BCA Assay
1. Bradford Protein Assay Kit
Bradford Protein Assay是一種快速定量蛋白質的方法，當 Bradford 染劑 commassie 在酸性環境下與蛋白質結合，會使試劑由褐色轉為藍色。此專一性呈色與蛋白質濃度呈正比，透過測定 OD595 nm 的吸光值，並比對蛋白標準品 (例如： BSA) 的校正曲線，即可獲得蛋白質濃度。
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| Bradford Protein Assay 蛋白標準曲線。 左: 蛋白濃度 <2 mg 的標準曲線 ; 右 : 蛋白濃度 > 2mg 的標準曲線。 蛋白濃度太高會超出 Bradford 的測定極限，標準曲線呈彎曲狀，導致濃度測定結果不準確。 |
2. BCA Protein Assay Kit
BCA (bicinchoninic acid) Protein Assay 是最常見的蛋白定量方法。此為兩劑型: 試劑 A 含有 BCA，試劑 B 則含有硫酸銅(CuSO4)。使用前混和兩種試劑，在鹼性環境下，蛋白質可將二價銅離子Cu2+還原為兩個單價銅離子Cu+，而一個Cu+可螯合兩個BCA分子，使試劑顏色由蘋果綠轉變為紫色。此專一性呈色與蛋白質濃度成正比，透過檢測 562 nm 的吸光值，比對蛋白標準品 (例如：BSA) 的標準曲線，即可獲得蛋白質濃度。
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| BCA Protein Assay 蛋白標準曲線 |
3. Bradford 和 BCA assay 比較表
4. 訂購資訊
蛋白膠體製膠溶液 EZ Gel Solution
T-Pro EZ Gel Solution 使用獨特的配方，可在電泳過程中自動堆疊蛋白質樣本，因此不需要製作上層膠 (聚集膠體)，且在配方中已預先混合緩衝液和 acrylamide，只需加入TEMED 和 APS 即可製膠。除節省時間外，還可讓蛋白質在更長的凝膠體上泳動。在 10 到 250 kDa 的分子量範圍內提供極佳的蛋白(條帶)分離效果。
1. 產品優勢
✓ 蛋白質分離效果卓越，媲美梯度膠
✓ 不須外加 acrylamide
✓ 15分鐘快速凝膠
✓ 室溫可穩定保存兩年
✓ TGS, MOPS running buffer 皆適用**
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| T-pro EZ gel solution 與自製膠和預製梯度凝膠之電泳圖比較。 以不同濃度的膠體分離 Omics RGB Prestained Protein Ladder(#02101-250)。 |
2. 配置參考
3. 建議電泳條件
4. 訂購資訊
化學冷光呈色 ECL Substrate
T-Pro ECL Kit 為高靈敏度、非放射性、增強型的化學冷光基質 (substrate)，可輕鬆檢測 Western blotting等多種檢測方法中的 horseradish peroxidase (HRP) 訊號。
1. 產品優勢
1. 訊號卓越和背景清晰
2. 靈敏度高
3. 訊號持久
2. 選購指南
3. 實例分享
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| T-Pro LumiDura Chemiluminescent Substrate Kit 檢測之訊號持久且靈敏。以 SDS-PAGE 電泳分離 293 total cellular lysate 後利用 monoclonal actin primary antibody 進行 western blot。以 Chemiluminescent Substrate, G牌 ECL & P牌 ECL 檢測訊號。此發光訊號是利用 X-ray film 顯影結果。 |
4. 訂購資訊
